核心概念:什么是CUE?
微生物碳利用效率(Carbon Use Efficiency, CUE) 是指微生物将吸收的碳(C)转化为自身生物量(Growth)的比例,
而不是通过呼吸(Respiration)释放回大气中的比例。
基于¹⁸O-H₂O(氧-18标记水)掺入DNA的方法
这是一个目前非常前沿和先进的技术,用于测量整个微生物群落的总碳利用效率,而不是针对某一种特定外源添加物(如葡萄糖)的利用效率。
方法原理详解:
标记:向土壤样品中添加¹⁸O标记的水(H₂¹⁸O)。微生物在生长繁殖、合成新DNA的过程中,会利用水环境中的氧原子。
掺入:¹⁸O原子会被掺入到新合成的DNA链的磷酸基团中。微生物生长越快,合成的新DNA越多,掺入的¹⁸O就越多。
提取与测量:培养结束后,提取土壤中所有微生物的总DNA。使用分子技术(如下一代测序)可以测量DNA中¹⁸O的富集程度,从而计算出微生物的总生长速率。
关联计算:同时,在培养期间测量土壤的基础呼吸速率(释放CO₂的速率)。将测得的生长速率与呼吸速率相结合,通过模型计算出整个微生物群落的平均CUE。
计算公式可以简化为:CUE = 生长速率 / (生长速率 + 呼吸速率)
土壤微生物碳利用效率(CUE)检测,我们为您制定的实验方案是目前国际上较为先进的基于¹⁸O-DNA稳定同位素探针技术。
该方法的核心原理是:
我们将向土壤样品中添加无害的氧-18(¹⁸O)标记水。微生物在生长过程中会将其掺入到新合成的DNA中。通过精密测量DNA中¹⁸O的富集程度,我们可以精确计算出微生物群落的总生长速率。同时,我们会监测培养过程中土壤的二氧化碳释放速率(呼吸速率)。最终,通过生长与呼吸速率的比值,计算出能反映土壤微生物群落整体代谢状态的碳利用效率(CUE)。
该方法的优势在于:
更接近真实情况:它测量的是微生物对土壤中原有总有机碳的利用效率,而不是对单一外源添加物(如葡萄糖)的响应,结果更能代表土壤真实的碳循环过程。
避免了添加底物的干扰:无需添加高浓度的糖类等底物,避免了因“糖冲击”而可能带来的测量偏差。
高通量且信息丰富:提取出的DNA后续还可用于微生物群落结构分析,能更全面地 linking 碳循环功能与微生物种类。
检测的成本主要构成如下:
核心同位素试剂(H₂¹⁸O)
土壤基因组DNA提取试剂盒
实验操作及分析人工成本
其他耗材与试剂