16S、18S、ITS等扩增子测序(二代) 一步到位检测环境微生物多样性
扩增子测序是对特定长度的PCR产物或捕获的片段进行测序,分析序列中的变异。
16S/18S/ITS等扩增子测序即通过提取环境样品的DNA,选择合适的通用引物扩增16S/18S/ITS的目标区域,
通过检测目标区域的序列变异和丰度,以研究环境微生物多样性及群落组成差异。
16S/18S rDNA为编码原/真核生物核糖体小亚基rRNA的DNA序列。
ITS分为两个区域:ITS1位于真核生物rDNA序列18S和5.8S之间,ITS2位于5.8S和28S之间。
16S/18S/ITS等扩增子测序(三代)
一次分析多个高变区信息,还原真实微生物群落结构
全长扩增子(16S/18S/ITS)测序基于Pacbio长读长测序平台,以16S为例,可以一次性获得9个高变区序列信息,获得注释到“种”的分类鉴定!不仅可以提高物种鉴定分辨率,还可以通过全长序列进行准确的物种注释,从而更加真实地还原样本中微生物的群落结构。
应用方向
细菌多样性研究:16S全长
真菌多样性研究:ITS全长
真核微生物多样性研究:18S全长
功能基因研究:反硝化细菌nirS、固氮菌nifH等
样本类型
土壤/污泥/沉积物/腐殖质
水体滤膜(孔径 0.22-0.45μm/直径 3-4cm)
拭子
瘤胃液/发酵液/组织液(离心有明显沉淀)
粪便/肠道内容物
动物/人组织
血浆
鲜奶
应用方向
医学领域:疾病与人体微生物间关系,如代谢类疾病、消化类疾病、自身免疫性疾病、肿瘤癌症、神经类疾病及其他疾病等
环境领域:某一特定环境(雾霾、沙尘等污染环境,住宅、商场等生活环境)的微生物群落组成,有机肥发酵处理、污水治理、石油降解、水体及海洋等微生物群落分布和组成等
畜牧领域:肠道、瘤胃等微生物与动物繁殖、生长发育、营养健康、免疫和疾病治疗等的互作关系
农业领域:根际微生物与植物互作、农业耕作/施肥处理与土壤微生物群落等
生物能源:特殊功能的菌株、工程菌的开发
特殊极端环境:极端环境条件下的微生物类群研究